广州复大肿瘤医院

生命的过程是温度依赖性的化学反应。当温度降到零度以上的低温时，细胞的生物化学反应能力减低，细胞膜离子通道发生障碍，细胞膜渗透性增强。但这种损伤通常是可逆的。当温度进一步降低至零度以下尤其 -40 ° C以下时即可发生以下改变 [1-3] ：

1．当温度低于-0.56 ℃ ，细胞间质液体冷冻，但细胞内液仍不冷冻。在正常情况下，膜蛋白通过选择性的导入或移出离子来控制细胞内外平衡。但在低温条件下，细胞膜蛋白平衡细胞内容物的能力减低，以致细胞内外电解质和渗透压发生改变，导致细胞脱水，细胞膜损伤。细胞内的成分特别是离子组成发生改变，蛋白变性，毒性离子从细胞外渗入细胞，化学键受损，细胞骨架相应受到破坏。当温度降低至 -10 ℃ ～ -15 ℃ ，冰晶开始在细胞内形成；温度迅速下降至 -40 ℃ ～ -100 ℃ 时，在细胞内外和微静脉及微动脉内大量冰晶迅速形成。冰晶形成是导致细胞死亡的主要原因，构成了现代冷冻治疗的理论基础。与此同时， Ca 2+ 内流，Ca 2+ -ATP酶活性下降，脂质过氧化反应增强，细胞间液张力过强，细胞内细胞器(线粒体、内质网)肿胀或消失，最后，细胞核碎裂或溶解。

细胞冷冻生物学的研究结果提示：组织细胞被低温损伤的过程可以分为三个阶段：温度过低 -冰晶形成-解冻复温。解冻和复温也会导致细胞损伤。随着冰晶的融化，细胞外的溶液可以部分或完全的成为高渗液，水分进入细胞，使细胞膜进一步损伤或破裂。如果消融的速度很快，某些细胞将在体温的条件下保持高渗，可导致细胞代谢的进一步的紊乱。基于这一原理，氩氦治疗系统在氩气冷冻后，采用氦气快速复温融解，从而保证了消融靶区细胞的完全死亡。

2．在冷冻过程中，冷冻区血循环被阻断。在消融短时间之后，冷冻区域边缘出现水肿，然后冷冻区域的血管内皮细胞出现损伤，几小时后，内皮细胞剥离,毛细血管壁通透性增加，钙离子流入血小板，引发血小板的激活和聚集、血管阻塞和血流停滞。在冷冻治疗后的几个小时内，小的血管可被完全封闭。失去了血液供应的靶组织最终因局部缺血而坏死。这种现象可以解释为什么在冷冻过程中，没有被冷冻的癌细胞也会死亡。

3．冷消融对抗肿瘤免疫的调控作用 [4-6] ：冷消融可以增强抗肿瘤免疫。对冷冻和未经冷冻的纤维肉瘤细胞膜抗原提取分析，发现冷冻后大分子（ >75kDa）抗原成分减少，小分子蛋白抗原成分（14-24kDa）明显增加。冷冻细胞来源的抗原的免疫原性高于未冷冻细胞来源的抗原；冷冻后抗肿瘤免疫的效应细胞主要是巨噬细胞和自然杀伤细胞（NK细胞）。巨噬细胞在冷冻后第14天开始增加，分泌白介-1、干扰素IL-1、IFN的活性增强，Ia抗原表达增加 [5] ；经冷冻处理的肿瘤细胞可以诱导特异性T淋巴细胞的细胞毒作用。

临床发现，接受冷冻治疗的原发性肝癌患者，治疗后 1周血液T淋巴细胞亚类CD3、CD4、CD8和NK细胞明显增加；将人肺癌细胞和自身淋巴细胞作体外混合培养，发现冷冻组淋巴细胞转化率(LTR)，及其培养上清液中可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)和白细胞介素6(IL-6)的表达，明显高于对照组(P<0.01)；冷冻组培养上清液对自身肺癌细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.01)，提示冷冻癌细胞可促进淋巴细胞活化增殖、细胞因子分泌，激发机体的抗肿瘤免疫反应；结肠癌病人被冷冻的组织边缘 IgG和IgA表达增强，提示冷冻治疗可以引起病人抗肿瘤抗体水平升高；肝癌患者冷冻治疗后30分钟肝内NF-kappaB细胞因子明显激活，术后1小时肝内，血清NF-kappaB水平升高，2小时开始恢复正常 [6。7] 。

有认为，冷消融可调控肿瘤抗原，减少肿瘤的免疫逃避。肿瘤组织细胞反复冻融，细胞破裂，细胞膜融解，从而促使细胞内和处于遮蔽状态的抗原释放 [8] 。肿瘤细胞的坏死，使得肿瘤正常分泌的抗原停止分泌，肿瘤免疫抑制状态解除。肺癌病人冷冻治疗后补体依赖性抗体介导的细胞毒作用较术前显著增高 (P<0.01)，而单纯手术根治组则无差异，提示冷冻可暴露肿瘤抗原，刺激机体的免疫系统。

应用方法和适应证

1．方法：可采用液氮或氩氦系统进行冷冻治疗。但前已述及，与液氮冷冻相比，氩氦系统更为适合临床应用，因为：①氩氦系统冷冻的速度快于液氮冷冻。如果冷冻速度慢，肿瘤细胞在冷冻初期会脱水，而免受进一步损伤，而且冷冻初期探子顶端易结冰，可阻碍冷冻向深层瘤组织扩散。氩氦系统冷冻由于冷冻发生得极快，可避免上述缺陷。又由于可用氦气升温，此种复温本身可导致瘤细胞进一步崩解；②急速冷冻使肿瘤立即固定，可避免因操作而引起的瘤细胞转移；③可进行经皮冷冻治疗；④有 2－８mm不同粗细的超导探子可供选择，只要定位准确，便可有效地破坏靶组织；④由于冷冻或加热仅限于，探子的杆保持常温，对正常组织破坏少，手术创伤轻微，加之血管在冷冻过程中闭塞，不会出血或甚少出血，因此术后恢复快，并可重复或反复治疗 [9] 。

冷冻探子可经皮穿剌入肿瘤内，也可在手术直视下穿剌。无论是经皮穿剌抑或手术中应用，均宜在超声引导下进行。冰球在超声下很易识别，表现为高回声环状，后有声影。

2．影响冷消融效应的因素 [10，11] ：冷冻损伤的方式很大程度上依赖于温度的变化。靠近冰球边缘的冷冻组织损伤，多是由于细胞脱水所致。如果结冰速度慢，先在组织间质中形成的冰晶会从细胞内部吸收水分。细胞内的失水会妨碍细胞内的结冰，在某种程度上保护了细胞免于低温损伤坏死，这也是液氮治疗后复发率高的原因。氩氦治疗系统可迅速致冷，使细胞内冰晶快速形成，结晶通过细胞之间的桥梁延伸到所有的组织细胞，产生一种“多米诺骨牌效应”。影响冷消融摧毁肿瘤作用的因素有：

（ 1）冷冻温度：冻融后癌细胞在不同温度下生存率显示：0 ℃ ～ -30 ℃ 细胞无明显损伤， -40 ℃ ～ -50 ℃ 死亡率明显增加，达到 40%～60%，冻融后部分存活细胞的损伤无法修复。液氮系统低温导致细胞损伤的温度一般在零下-50 ℃ ～ -60 ℃ ，氩氦治疗系统超低温细胞损伤的温度范围是零下 -38 ℃ ～ -40 ℃ 。

（ 2）冷冻速率：低温引起细胞死亡的效应与细胞内冰晶形成的速度密切相关。实验研究发现，当冷冻率为每分钟下降25 ℃ 时，在 -15 ℃ 可观察到一个突然增加的细胞死亡高峰。细胞死亡的增加的比率与细胞内冰晶形成率密切相关。冷媒的冷冻率受冷媒流动压力、阻力、传导及回收方式等因素的影响。氩氦治疗系统用气体冷媒取代了液体冷媒，以致冷冻率较其他冷冻系统快。

（ 3）冷冻时间：当冷冻温度达到一定范围后，细胞损伤程度与冷冻持续时间呈正相关。癌细胞在 -40 ℃ 冷冻下，细胞死亡率随时间延长而有所增加， 8小时达60%～85%，24小时达84%-94%，24小时达到最大值。应用氩氦治疗系统进行动物实验，证实氩气超低温持续治疗时间以15-20分钟为宜。

（ 4）多次冷冻的作用：氩氦治疗系统与常规冷冻设备一个不同点是引进了氦气升温系统，使得低温治疗中可多次循环融冻。第二次冷冻所致损伤的机制与第一次相同，但暴露于脱水及重脱水循环的细胞更易死亡。对动物肾脏的单次和双次冷冻效应进行测试，证实单次冷冻组织细胞坏死的关键温度是-61.7℃（95%的可信区间是-74.5℃～-48.9℃），双次冷冻组织细胞坏死的关键温度是-41.1℃(95%可信区间是-49.9℃至-33.0℃)。应用热力学第一定律模型，评估单个探子单次及双次冷冻产生的坏死区半径，发现双次冷冻坏死区的半径大于单次冷冻。

（ 5）热池效应对冷冻的影响：冷冻靶区边缘如靠近大血管，由于血液循环的热效应，即血管的热池效应可抵抗冷冻效应。但常常大血管周围的肿瘤组织细胞坏死但血管壁并没有明显损伤。有学者提出当动脉血管直径大于4毫米时，冷冻不会损伤血管。提示了本项治疗的安全性。

（ 6）冷消融区的形成：氩氦治疗系统配备4或8个氩氦刀探子（细针）。探子的直径为1.5～8毫米，当输出高压常温氩气（冷媒）时，氩气在探子尖端内急速释放，沿探子顶端由内向外，形成可控制的倒梨状冷冻区，使靶区病变组织内温度在几十秒内降至-130～175 ℃ 。在临床治疗中冷冻消融靶区的形成受以下几种因素的影响：①探子直径的大小： 2mm、3mm、5mm、8mm的探子可分别产生最大长径范围为2～3cm、5～6cm、7～8cm、9～10cm的消融靶区（冰球）。靶区温度范围为-38 ℃ 到 -175 ℃ ，距边缘 8mm以内温度较高，因而治疗时冷冻区应该超过病变边缘的1～2厘米。②氩气输出功率：氩氦治疗系统的气体输出功率的调控范围为0～100%。例如输出功率为100%时，2mm、3mm、5mm、8mm的探子，可分别产生最大直径为2～3cm、5～6cm、7～8cm、9～10cm的冰球靶区；当氩气输出功率的调控范围为50%时，则分别产生最大直径为1～1.5cm、2.5～3cm、3.5～4cm、4.5～5cm的冰球靶区。③氩气的输出压力：一般氩氦治疗系统配备氩气容器的最大压力为6，000 psi（41.4兆帕），产生理想冷冻效应所需的工作压力范围是2500-6000 psi，当压力低于2000 psi时将影响冰球的形状、大小及冰球的形成速度。④生物学媒介：预先局部注射高渗盐水，可以增大冷冻消融靶区；治疗后局部注射乙醇可以提高消融效果；有人在冷冻区注入化疗药，是为化学冷消融，谓能增强疗效。⑤冷冻组织的生物学特性：肿瘤组织间液及含水量的多少、组织细胞类型、纤维结缔组织的密度等，将影响冷冻的效果，如肺组织内的气体将影响低温冷效应的传导，以致冰球形成速度较慢；脑组织间液含水量较多，冷冻范围常大于其它器官组织。

3．冷消融后形态学：冷冻复温后组织外观几乎完全正常，不能分辨损伤范围，稍后，冷冻取水肿、充血，外围有狭带亮区，局部温度升高，2天后冷冻中心区完全坏死，外周有2-5mm的部分损伤区。据绵羊乳腺癌模型研究，冷冻１次和３次，组织大体和显微镜下改变无差异；冷冻区内上皮细胞全部破坏，愈合后形成疤痕；冷冻破坏区到健康组织之间，有一５mm过渡区；冷冻破坏区较超声显示的冰球为大；冷冻后５个月时，冷冻破坏区约缩小一半。

影像学显示，手术后一周，冷冻区组织在非增强的CT成像中表现为高度液化区，而在增强CT成像中则表现为无血管区；术后一周至三个月内，冷冻组织周围被高密度的、加强边缘围住；几个月内，坏死的组织被吸收，冷冻区最终变为被正常的肝脏组织所包围的疤痕，较小血管通常会再接通，并跨过冷冻区；在冷冻区周围如有组织生长的现象，应考虑复发。

4．冷消融适应证：在美国，氩氦冷冻系统最初用于治疗前列腺癌。目前该技术除作为前列腺癌的首选治疗手段外，已用于治疗各种实质性肿瘤。临床资料表明，氩氦刀对肝癌、肺癌、肾癌、乳腺癌、脑肿瘤、胰腺癌及各种浅表肿瘤均有良好效果。

广州复大肿瘤医院自 2001年应用该技术治疗各种肿瘤，迄今已逾1500例.现将1340例的统计结果列于表1。

表 1 氩氦冷消融治疗治疗肿瘤患者 1340例

（广州复大肿瘤医院， 2001-2004，6）
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－

氩氦冷消融的临床应用

1．原发性肝癌： 1979年Dutta 等首先在犬实验模型证明冷冻可消融大块肝组织 (12) 。手术中冷冻对肝细胞肝癌，尤其对小肝癌的疗效，相似于或超过手术切除，23 5例肝癌患者接受手术中冷冻治疗，1、3和5年生存率分别为78%、54%和40% [13] 。国外两组资料报告显示本法治疗后生存率，1年为8.24%～90%,3年32.3%～40%,5年13.4%～20%。对于较大的进展型肝癌,术后1和3年生存率分别为59%和22% [14，15] 。 Lam [16] 等给4例曾作过治愈性肝切除的复发性肝癌患者作冷消融治疗，术后12-23个月全部健存。 Bilchik等在308例肝癌病人比较了射频和冷冻治疗的效果，发现两者虽然同样安全，但射频仅适用于小肿瘤，对大的肿瘤则以冷冻疗法为好。

生存 2003年我们曾总结经皮冷消融治疗65例肝癌的效果 [17] 。在平均随访期16个月内，50.8%无瘤生存，32.3%带瘤生存。在随访1年以上的41例病人中，78.0%迄今仍生存。22例接受冷消融治疗瘤块的活检，除1例外，均显示为坏死或疤痕性组织。治疗前血清αFP升高的病例中，91.3%在治疗后3－6个月内αFP下降到正常或接近正常的水平。

为了防止冷消融周边区肿瘤复发，可联合应用经皮酒精注射（ PEIT），在冷消融破坏绝大部分肿瘤组织后，在肿瘤的周边部给予PEIT，以破坏残存的瘤组织 [18] 。我们对 3 6例瘤块直径大于6 cm的患者，在冷消融后1-2周开始接受PEIT治疗。虽然由于未设对照组，难以判断其疗效，但在肝内肿瘤复发的17例中，仅有3例复发发生原先冷冻部位，显然与这种联合治疗有一定关系。

冷消融联合化学栓塞治疗可提高疗效。 Clavien 等 (19) 报道在冷消融前作化学栓塞治疗，能增加对大肝癌的疗效，并可预防出血。15例患者接受此种治疗后，5 年生存率高达79%。自2001年4月以来，我们有 3 60例原发性肝癌（PLC）患者接受经皮冷消融-肝动脉化学栓塞联合治疗。肝内瘤块均大于5cm。在220例肿瘤为单个，其余为多个，但不超过5个。伴门静脉癌栓、肝衰竭（血清胆红素超过34 m mol/L,凝血酶原时间超过正常对照3 s）和明显腹水者除外。所有病例经过仔细评价，均失去手术切除机会。化学栓塞系采用经皮经肝动脉插管，视肿瘤部位，插管至左或右肝固有动脉或支配肝肿瘤的动脉分支。2周后作CT观察栓塞效果，如果肿瘤已被碘化油完全充填，则予冷消融治疗，否则再作化学栓塞，但不超过3次。必要时冷消融治疗后1个月再作化学栓塞1-2次。结果显示在中位随访期21个月（6－36个月）内，肿瘤完全反应（CR）8.3%，部分反应(PR)63.3%，无明显改变(NC)18.3%，进展(PD)10.0%。血清甲胎蛋白（AFP）治疗前升高的病例中，治疗后于86.9%的病例下降，于62.0%降至正常范围。呈CR 和PR的病例中，有26.7%在治疗后4-15个月内复发，但其中仅15.9% `在原冷冻部位复发，其余均为异位生长。生存率半年90.6%，1年70.0 %，2年52.1%，3年41.1%。

肿瘤　　　例数　　　　　　　　 %
--------------------------------------------
l 　　　肺癌　　　　　　　408 30.44
l 　　　肝癌、胆管肿瘤　　　 526 39.25
l 　　　胰腺癌　　　　　　　23 17.16
l 　　　脑胶质瘤　　　　　　 46 37.32
l 　　　神经纤维瘤　　　　　　 3 0.22
l 　　　神经鞘瘤　　　　　　　 2 0.14
l 　　　乳腺癌　　　　　　　　21 1.56
l 　　　软组织肿瘤　　　　　109 8.13
l 　　　骨肿瘤　　　　　　　　26 1.94
l 　　　肾癌　　　　　　　　　 7 0.52
l 　　　膀胱癌　　　　　　　　2 0.14
l 　　　前列腺癌　　　　　　　 6 0.44
l 　　　直肠癌　　　　　　　　19 1.42
l 　　　卵巢癌　　　　　　　　 21 1.56
l 　　　宫颈癌　　　　　　　　19 1.42
l 　　　皮肤癌　　　　　　　　　 6 0.44
l 　　咽喉肿瘤　　　　　　　　　 3 0.22
l 　　子宫肌瘤　　　　　　　　 31 2.31
l 　　　淋巴瘤　　　　　　　　　6 0.44
l 　　食道肿瘤　　　　　　　　1 0.07
l 　　　畸胎瘤　　　　　　　　　 9 0.67
l 　　　腹膜后肿瘤　　　　　　26 1.94
l 　　胸膜腹膜间皮瘤　　　　　10 0.75
l　　上颌窦肿瘤　　　　　　　3 0.44
l 　　　舌癌　　　　　　　　　4 0.28
l 　　　腮腺癌　　　　　　　　 3 0.22

----------------------------------------------

死亡 113例，其原因：肝癌广泛转移45例，食管静脉曲张大出血24例，自发性腹膜炎23例，肝性脑病14例，其他非肝癌相关性疾病7例。

氩氦冷消融治疗肝癌的优点是 [20] ：①仅破坏肝内瘤组织，而保存较多未受累的组织，这对伴有肝硬化，肝储备能力差的肝癌患者尤为重要 [21] ；②由于流动血液的温热作用，邻近大血管的肿瘤可安全的接受冷冻治疗，而手术切除这些肿瘤是困难的 [22] ；③可有效地治疗多发性肝肿瘤；④其他局部疗法如射频，难以消融大于 5 cm的肿瘤，而冷消融可治疗这些大的肿瘤。

近年来发现，冷消融治疗肝癌后复发率可能低于手术切除后。大鼠孤立性肝肿瘤冷消融治疗后生存率较之切除后为高 (23) 。 Allen等 (24) 将实验性肝癌大鼠分为2组，分别作肿瘤部分肝切除(切除30%)和冷消融。2周后，脾内注入肝癌细胞悬液。3周后处死动物，检查肝内肿瘤种植数目。结果显示冷冻组肝内肿瘤数明显低于肝部分切除组。有研究发现部分肝切除后，肝生成一系列能促进残存肝肿瘤生长的因子，尤其是碱性纤维生长因子（FGF－basic）增加 [25] ，而冷消融不会促进这种因子的生成 (24) ，可能这是肿瘤复发较少的原因。冷消融后留下的冷冻肿瘤组织可作为抗原，刺激肿瘤免疫产生。在冷冻组周围，常有明显炎症反应，主要是淋巴细胞，提示存在抗瘤细胞的免疫反应 [26] 。如果以上研究得到进一步证明，则对于即使可以切除的肝肿瘤，冷消融可能不一定亚于手术切除，而对于“不能切除或估计切除效果不好”的肝肿瘤，冷消融疗法不失为一很好的选择。

2．肝转移癌：来自结肠癌转移、血清 CEA低水平、转移灶小、原发性肿瘤分化较好者，冷冻治疗效果较好。 Rivoire 等 [27] 报告 19例肝转移癌,140个转移瘤，冷冻治疗90个转移瘤。在平均28个月的随访期内，16例出现复发，但仅2例(10%)复发发生于冷冻部位，9例(47%)发生于残存肝 5例(26%)为肝外复发。 Stubbs 等 [28] 报告 30 例大肠癌肝转移，肝内肿瘤 1~7.2cm 经冷冻治疗后，平均生存期 2～3月。 Seifert等 (29) 自1996年起，应用冷消融治疗71例肝癌病人，其中除6例为原发性肝癌，其余为转移性肝癌，主要为结直肠癌肝转移。平均每例有肿瘤2.6个，5大小平均3.7cm，有36例联合肝切除。结果显示中位生存期在原发性和转移性肝癌分别为28和29个月，3年生存率分别为38%和43%，5年生存率分别为30%和33%。Ruers等 (30) 随访了30例结直肠癌肝转移手术中冷冻治疗的效果，无病生存率1年为35%，2年为7%，冷冻处局部复发率9%，总1 和2年生存率分别为76%和61%，中位生存期32个月。

3．直肠癌： Meijers 等 [31] 报告进展期直肠癌 106例(45-92岁)接受冷冻姑息治疗后，局部症状完全缓解66例(62%)，姑息指数[(症状改善月数/治疗后存活月数)×100]88%，半存活期33个月，17例(16%)症状中度改善，28例(22%)无效。

4．肺癌：冷消融对支气管肺癌的治疗目前仅限于支气管镜下应用。 Vergnon 等 [32] 应用支气管镜下冷冻，治疗38例不能切除性非小细胞性肺癌，26例（%）肿瘤缩小50%以上，该26例患者再接受放疗后，有17例支气管内肿瘤完全消失。Maiwand等 [33] 在9年内对521例进展性阻塞性气管支气管肿瘤患者进行了支气管下冷冻治疗，取得了改善症状，提高生活质量的效果，2年生存率15.9%。另在15例患者作剖胸直接冷冻，术后中位生存期11.6个月（6.8－68.2）。经皮治疗支气管外肺癌已有初步经验。Dupuy等 [34] 报告在CT引导下作经皮射频消融，治疗4例肺癌，取得良好效果。Marchand等 [12] 用类似方法治疗1例转移性肺癌，术后肿瘤形成空洞，1年后仍维持疗效。

经皮冷消融治疗肺癌，尚少报道。但在其他实质性肿瘤治疗的经验，提示可将这种局部靶点冷消融技术，用于治疗肺癌，而且由于冷冻范围可较大，不会伤及大的血管，对肺癌的治疗可能更有效和安全。我们给 120 例非小细胞性肺癌患者进行经皮冷消融治疗，随访时间超过 2 年。在 B 超或 CT 引导下，将穿刺导管经皮插入肿瘤中心进行冷消融。结果：治疗后症状改善率胸痛 78.5%,咯血 79.2% ，咳嗽 69.1% ，呼吸困难 72% 。上述一种或几种症状改善的持续时间 1 － 21 个月，中位 13 个月；治疗后 3 个月，有 CT 复查资料者 98 例中， CR 25.5% ， PR 41.8% ，微反应（MR） 21.4% ， NC 11.2% ；有 48 例（ 40% ）在随访期出现肿瘤复发， 12 例（ 10% ）在肺外出现转移灶。目前仍生存的 84 例中，最长已生存 24 个月。生存率:6 个月 64% ； 12 个月 55% ； 18 个月 44% ； 24 个月 36% 。并发症：2 例并发气胸， 4 例并发血胸， 5 例并发肺部感染,经对症处理后消失。

对于支气管癌，可采用氩氦冷消融与光动力疗法联合治疗，以分别消除支气管外和内的病变，两者相辅相成。我们有 41例非小细胞性阻塞性肺癌患者，或者因为肿瘤局部进展（按TNM分期为Ⅲb期），或者因为肺功能差（严重阻塞性肺病），被认为是不能切除性的。先予光动力疗法。静脉注射光敏剂Photofrin　2mg/kg（或血卟啉5mg/kg，华鼎药业），48和72小时分别在支气管镜下输入630nm红色激光照射；再在B超或CT引导下通过氩氦系统进行经皮冷消融。按症状、肿瘤大小和生存期判断疗效。治疗后， 90.2 %的患者主观症状有不同程度改善，

症状积分治疗后明显降低 ,呼吸困难的改善最为明显；支气管镜复查，发现全部患者支气管内肿瘤均得到不同程度消融，其中41.5%完全消失；CT复查发现肺内肿瘤CR 34.1%,PR 41.4%;X线片上，原有肺塌陷的病例中29.6%的塌陷完全消失，70.4%的肺塌陷减轻；半年和1年生存率分别达44和71%。无论光动力抑或经皮氩氦系统冷消融，均未发生严重并发症。

副作用

冷消融是一种相对安全的治疗方法 [35] 。暂时性血小板减少和低血糖也可发生，大肿瘤（大于 5cm）患者治疗后可发生凝血异常。肝肿瘤如邻近膈顶部，术后可发生胸腔积液。肝包膜裂开是最严重的并发症，发生在复温过程中，多数通过保守治疗可以控制，我们见到1例。有学者报道可并发冷休克，表现为不同程度的肾衰竭、弥漫性血管内凝血和成人呼吸窘迫综合征，其发生与冷冻的组织容量（＞40%）成正比，大于6 cm的肿瘤冷冻后易发生，但我们治疗的病例中大于 10 cm的肿瘤冷消融后并未发生此种并发症。有认为冷冻时间比之冷冻组织容量对于冷休克发生更为重要 [18] 。不管怎样，应积极预防这种严重并发症，对所有病例应给予利尿剂和甘露醇，碱化尿，以防止肌红蛋白尿和由此引起的肾损伤。

参考文献

[1]Boris Rubinsky. Cryosurgery (to appear Annual Reviews in Biomedical Engineering, 2000) Biomedical Engineering Laboratory, Department of Mechanical Engineering, University of California at Berkeley, Berkeley, CA 94720

[2]The cryobiology of cryosurgical injury. Urology. 2002;60(2 Suppl 1):40-49. [3]Hoffmann NE, Bischof JC. The cryobiology of cryosurgical injury. Urology. 2002 ;60(2 Suppl 1):40-49.
[4] Urano M, Tanaka C, Sugiyama Y, Miya K, Saji S. Antitumor effects of residual tumor after cryoablation: the combined effect of residual tumor and a protein-bound polysaccharide on multiple liver metastases in a murine model. Cryobiology. 2003 ;46(3):238-45.

[5] Horio T, Miyauchi H, Kim YK, Asada Y. The effect of cryo-treatment on epidermal Langerhans cells and immune function in mice. Arch Dermatol Res. 1994;286(1):69-71.
[6] Ablin RJ. An immune response: a possible caveat to endoscopic cryotherapy. Cryobiology. 2001;42(1):59-68.
[7] Hoffmann NE, Coad JE, Huot CS, Swanlund DJ, Bischof JC. Investigation of the mechanism and the effect of cryoimmunology in the Copenhagen rat. Cryobiology. 2001;42(1):59-68.
[8] Johson JP.Immunologic aspects of cryosurgery: potential modulation of immune recognition and effector cell maturation. Clin Dermatol. 1990 Jan-Mar;8(1):39-47. [9]Dawber R.Cryosurgery:unapproved uses,dosages,or indications.Clin Dermatol 2002;20:563-570

[10]张静仁（主编）.氩氦靶向肿瘤治疗技术. A Pioneer Bioscience Pub 2003:22-32.

[11]Hewitt PM,Zhao J,Akhter J,Morris DL.A comparative laboratory study of liquid nitrogen and argon gas cryosurgery systems.Cryobiology 1997;35:303-308.

[12]Dutta P,Montes M,Gage A.A large volume freezing in experimental hepatic cryosurgery.Avoidance of bleeding in hepatic freezing by an improvement in the technique.Cryobiology 1979;16:50-55.

[13]Zhou XD,Tang ZY,Yu YQ,and Ma ZC.Clinical evaluation of cryosurgery in treatment of primary liver cancer.a report of 113 cases.J Cancer Res Clin Oncol 1993;120:100-102.

[14]Ruers TJ,Joosten J,Jager GJ,Wobbes T.Long-term results of treating hepatic colorectal metastases with cryosurgery .Br J Surg 2001;88:844-899

[15] Seifert JK,Heintz A,Junginger T.Cryotherapy for primary and secondary liver tumour.Zentralbl Chir 2002;127:275-281

[16] Lam CM,Yuen WK,and Fan ST.Hepatic cryosurgery for recurrent hepatocellular carcinoma after hepatectomy:a preliminary report.J Surg Oncol 1998;68:104-106

[17]Xu KC,Niu LZ,He WB,Guo ZQ,Hu YZ,Zuo JS.Percutaneous cryoablation in combination with ethanol injection for unresectable hepatocellular carcinoma.World J Gastroenterol 2003;9:2686-2689.

[18] Wong WS,Patel SC,Cruz FS,Gala KV,Turner AF.Cryosurgery as a treatment for advanced stage hepatocellular carcinoma.Am Cancer Soc 1998;82:1268-78.

[19] Clavien PA,kang KJ,Selzner N,Morse MA,Suhocki PV.Cryosurgery after chemoembolization for hepatocellular carcinoma in patients with cirrhosis.J Gastrointest Surg 2002;6:95-101

[20 ] Shafir M,Shapiro R,Sung M,Warner R,Sicular A,Klipfel A.Cryoablation of unresectable malignant liver tumors.Am J Surg 1996;171;27-31.

[21] Bilchik AJ,Sarantou T,Wardlaw JC,Ramming KP.Cryosurgery causes a profound reduction in tumor markers in hepatoma and non-colorectal hepatic metastases.Am Surg 1997;63:796-800.

[22]Seifert JK,Morris DL.Indicators of recurrence following cryotherapy for hepatic metastascolonrectal cancer.Br J Surg 1999;86:234-240.

23]Tanaka, S. Immunological aspects of cryosurgery in general surgery. Cryobiology 1982 ； 19:247

[24] Allen PJ, D'Angelica M, Hodyl C, Lee J, You YJ, and Fong Y, The effects of hepatic cryosurgery on tumor growth in the liver J Surg Res 1998;77:132-136.

[25] an, M, Huang, JS, Mansson, PE, Yasumitsu, H, Carr, B, and McKeehan, WL. Heparin-binding growth factor type 1(acidic fibroblast growth factor): a potential biphasic autocrine and paracrine regulator of hepatocyte regeneration. Proc. Natl. Acad. Sci. USA1989 ； 86:7432

[26] Jacob, G., AK, and Hobbs, K. E. A comparison of cryodestruction with excision or infarction of an implanted tumor in rat liver. Cryobiology 1984 ； 21:148

[27] Rivoire M, De Cian F, Meeus P, Gignoux B, Frering B, Kaemmerlen P. Cryosurgery as a means to improve surgical treatment of patients with multiple unresectable liver metastases. Anticancer Res. 2000 ;20(5C):3785-90.

[28] Stubbs RS, Alwan MH, Booth MW. Hepatic cryotherapy and subsequent hepatic arterial chemotherapy for colorectal metastases to the liver. HPB Surg. 1998;11(2):97-104.
[29]Seifert JK,Heintz A,Junginger T.Cryotherapy for primary and secondary liver tumour.Zentralbl Chir 2002;127:275-281

[30] Ruers TJ,Joosten J,Jager GJ,Wobbes T.Long-term results of treating hepatic colorectal metastases with cryosurgery .Br J Surg 2001;88:844-899

[31] Meijer S, Rahusen FD, van der Plas LG. Palliative cryosurgery for rectal carcinoma.Int J Colorectal Dis. 1999;14(3):177-80.

[32] Vergnon J-M,Schimitt T,Alamartine E,Barthelemy J-C,Fournel P,Emonot A.Initial combined cryotherapy and irradiation for unresectable non-small cell lung cancer.Chest 1992;102:1436-1440.
[33] Maiwand MO, Asimakopoulos G.Cryosurgery for lung cancer: clinical results and technical aspects. Technol Cancer Res Treat. 2004 ;3(2):143-50.
[34] Dupuy DE,Zagoria RJ,Akerley W,Mayo-Smith WW,Kavanagh PV,Safran H.Percutaneous radiofrequency ablation of malignancies in the lung.AJR 2000;174:57-59

[35] Lau WY,Leung TW,Yu SC,Ho SK.Pecutaneous local ablative therapy for hepatocellular carcinoma:a review and look into the future.Ann Surg 2003;237:171-179

[36] Adam R,Majno P,Castaing D ,et al.Treatment of irrectable liver tumors by percutaneous cryosurgery.Br J Surg 1998;85:1493-1494.

[37] Seifert JK,Morris DL.Indicators of recurrence following cryotherapy for hepatic metastases of colonrectal cancer.Br J Surg 1999;86:234-240.

[38] Dwerryhouse SJ,Seifert JK,McCall JL,Iqbal J,Rossate WB,Morris DL.Hepatic resection with cryotherapy to involved or inadequate resection margin(edge freeze) for metastases from colorectal cancer.Br J Surg 1998;85:185-187

[39] Shafir M,Shapiro R,Sung M,Warner R,Sicular A,Klipfel A.Cryoablation of unresectable malignant liver tumors.Am J Surg 1996;171;27-31.